Учёный изучал влияние различных веществ на активность фермента уреазы. В качестве источника уреазы он использовал семена арбуза. Семена растирались в ступке, после чего к ним добавлялся буферный раствор, и эта смесь перемещалась в пробирки. В пробирки добавлялся субстрат фермента уреазы (мочевина) и индикатор рН фенолфталеин (при протекании реакции в пробирке меняется рН). Помимо этого, в пробирки добавлялись различные вещества — претенденты на роль ингибиторов и определялось, изменился ли рН через 20 минут реакции. Результаты эксперимента учёный занёс в таблицу.
| Вещество | Прошла ли реакция |
|---|---|
| отвар зелёного чая | да |
| фторид натрия | да |
| хлорид натрия | да |
| нитрат серебра | нет |
| пероксид водорода | да |
| сульфат никеля | да |
| ацетат свинца | нет |
Как ещё можно инактивировать фермент, помимо добавления ингибиторов? Объясните, из-за чего происходит инактивация фермента. Предложите не менее двух способов инактивации.
1. Можно нагреть (прокипятить) пробирку с ферментом.
2. Можно добавить кислоту или основание так, чтобы сильно изменился рН раствора.
3. При этом нарушается трёхмерная структура белка (белок денатурирует).
4. Из-за чего активный центр перестаёт связываться с субстратом.
Какая переменная в этом эксперименте будет зависимой (изменяющейся), а какая — независимой (задаваемой)? Объясните, как в данном эксперименте можно поставить отрицательный контроль*. С какой целью необходимо такой контроль ставить?
(*Отрицательный контроль — это экспериментальный контроль, при котором изучаемый объект не подвергается экспериментальному воздействию).