1)  метод хро­ма­то­гра­фии

2)  метод ос­но­ван на раз­де­ле­нии пиг­мен­тов из-за раз­ли­чий в ско­ро­сти дви­же­ния пиг­мен­тов в рас­тво­ри­те­ле (по­движ­ной фазы по не­по­движ­ной фазе)

При­ме­ча­ние.

Впер­вые точ­ное пред­став­ле­ние о пиг­мен­тах зелёного листа выс­ших рас­те­ний было по­лу­че­но бла­го­да­ря ра­бо­там круп­ней­ше­го рус­ско­го бо­та­ни­ка М. С. Цвета (1872—1919). Он раз­ра­бо­тал хро­ма­то­гра­фи­че­ский метод раз­де­ле­ния ве­ществ и вы­де­лил пиг­мен­ты листа в чи­стом виде. Хро­ма­то­гра­фи­че­ский метод раз­де­ле­ния ве­ществ ос­но­ван на их раз­лич­ной спо­соб­но­сти к ад­сорб­ции. Метод этот по­лу­чил ши­ро­коё при­ме­не­ние. М. С. Цвет про­пус­кал вы­тяж­ку из листа через стек­лян­ную труб­ку за­пол­нен­ную по­рош­ком  — мелом или са­ха­ро­зой (хро­ма­то­гра­фи­че­скую ко­лон­ку). От­дель­ные ком­по­нен­ты смеси пиг­мен­тов раз­ли­ча­лись по сте­пе­ни ад­сор­би­ру­е­мо­сти и пе­ре­дви­га­лись с раз­ной ско­ро­стью, в ре­зуль­та­те чего они кон­цен­три­ро­ва­лись в раз­ных зонах ко­лон­ки. Раз­де­ляя ко­лон­ку на от­дель­ные части (зоны) и ис­поль­зуя со­от­вет­ству­ю­щую си­сте­му рас­тво­ри­те­лей, можно было вы­де­лить каж­дый пиг­мент. Ока­за­лось, что ли­стья выс­ших рас­те­ний со­дер­жат хло­ро­филл а и хло­ро­филл b, а также ка­ро­ти­но­и­ды (ка­ро­тин, ксан­то­филл и др.). Хло­ро­фил­лы, так же как и ка­ро­ти­но­и­ды, не­рас­тво­ри­мы в воде, но хо­ро­шо рас­тво­ри­мы в ор­га­ни­че­ских рас­тво­ри­те­лях. Хло­ро­фил­лы а и b раз­ли­ча­ют­ся по цвету: хло­ро­филл а имеет сине-зе­ле­ный от­те­нок, а хло­ро­филл b  — желто-зе­ле­ный. Со­дер­жа­ние хло­ро­фил­ла а в листе при­мер­но в три раза боль­ше, чем хло­ро­фил­ла b.