1) кле­точ­ная ин­же­не­рия

А)  Куль­ту­ра изо­ли­ро­ван­ных тка­ней обыч­но бы­ва­ет пред­став­ле­на кал­лу­сны­ми или реже – опу­хо­ле­вы­ми тка­ня­ми. Ото­рван­ная от кол­лек­ти­ва себе по­доб­ных клет­ка в про­бир­ке со­хра­ня­ет «па­мять» - ге­не­ти­че­скую ин­фор­ма­цию, за­ло­жен­ную ро­ди­те­ля­ми. Но спе­ци­а­ли­за­цию она утра­чи­ва­ет и об­ра­зу­ет при де­ле­нии нечто аморф­ное, на­по­ми­на­ю­щее по форме мор­скую губку – кал­лус– это ткань, ко­то­рая воз­ни­ка­ет не толь­ко в про­бир­ке, но и в есте­ствен­ных усло­ви­ях при по­ра­не­нии рас­те­ния.

Ре­ге­не­ра­ции пол­но­цен­ных рас­те­ний из кал­лу­са до­би­ва­ют­ся в прин­ци­пе двумя пу­тя­ми: диф­фе­рен­ци­а­ци­ей по­бе­гов и кор­ней по­сред­ством из­ме­не­ния со­от­но­ше­ния гор­мо­нов ци­то­ки­ни­на и аук­си­на или об­ра­зо­ва­ни­ем эм­брио­и­дов. Этот со­ма­ти­че­ский (асек­су­аль­ный) эм­брио­ге­нез впер­вые был про­сле­жен к 1959 г. у мор­ко­ви; со вре­ме­нем его стали при­ме­нять при про­из­вод­стве жиз­не­спо­соб­ных рас­те­ний у раз­ных видов.

В)  Ги­бри­ди­за­ция со­ма­ти­че­ских кле­ток

Со­зда­ние не­по­ло­вых ги­бри­дов путем сли­я­ния изо­ли­ро­ван­ных про­то­пла­стов, по­лу­чен­ных из со­ма­ти­че­ских кле­ток. Этот метод поз­во­ля­ет скре­щи­вать фи­ло­ге­не­ти­че­ски от­да­лен­ные виды рас­те­ний, ко­то­рые не­воз­мож­но скре­стить обыч­ным по­ло­вым путем, вы­зы­вать сли­я­ние трех и более ро­ди­тель­ских кле­ток, по­лу­чать асим­мет­рич­ные ги­бри­ды, не­су­щие весь ген­ный набор од­но­го из ро­ди­те­лей на­ря­ду с не­сколь­ки­ми хро­мо­со­ма­ми или ге­на­ми, или толь­ко ор­га­нел­ла­ми и ци­то­плаз­мой дру­го­го. Ги­бри­ди­за­ция со­ма­ти­че­ских кле­ток дает воз­мож­ность не толь­ко со­еди­нить в одном ядре гены да­ле­ких видов рас­те­ний, но и со­че­тать в ги­брид­ной клет­ке ци­то­плаз­ма­ти­че­ские гены парт­не­ров.

Г)  Транс­план­та­ция ядер кле­ток

В по­след­нее время раз­ра­бо­та­но не­сколь­ко эф­фек­тив­ных ме­то­дов, поз­во­ля­ю­щих изу­чать вза­и­мо­от­но­ше­ния ядра и ци­то­плаз­мы.

Наи­бо­лее важ­ное зна­че­ние, по-ви­ди­мо­му, имеет метод пе­ре­сад­ки ядра одной клет­ки в ци­то­плаз­му дру­гой клет­ки, из ко­то­рой пред­ва­ри­тель­но уда­ли­ли соб­ствен­ное ядро. На­блю­де­ния за по­ве­де­ни­ем таких кле­ток поз­во­ля­ют изу­чать вли­я­ние объ­еди­не­ния ядра и ци­то­плаз­мы раз­ных кле­ток на по­ве­де­ние обоих ком­по­нен­тов.

Хотя боль­шин­ство при­зна­ков ядер­но-ци­то­плаз­ма­ти­че­ских ги­бри­дов, не­со­мнен­но, опре­де­ля­ет­ся ядром, не­ко­то­рые из них в от­дель­ных слу­ча­ях могут кон­тро­ли­ро­вать­ся ци­то­плаз­мой и со­хра­нять­ся в ряду мно­гих кле­точ­ных по­ко­ле­ний.

2) ген­ная ин­же­не­рия

Б)  вве­де­ние плаз­мид в бак­те­ри­аль­ные клет­ки.

По раз­ме­ру плаз­ми­ды мень­ше бак­те­ри­аль­ных хро­мо­сом и со­дер­жат от 8 до 200 тыс. нук­лео­тид­ных пар. В одной клет­ке может на­хо­дить­ся от 1—2 до не­сколь­ких де­сят­ков плаз­мид. Это число по­сто­ян­но. Плаз­ми­ды реп­ли­ци­ру­ют­ся (раз­мно­жа­ют­ся) не­за­ви­си­мо от бак­те­ри­аль­ной хро­мо­со­мы. Но не­ко­то­рые плаз­ми­ды, так на­зы­ва­е­мые эпи­со­мы, могут встра­и­вать­ся в хро­мо­со­му и реп­ли­ци­ро­вать­ся вме­сте с ней. Тран­скрип­ция и транс­ля­ция ге­не­ти­че­ско­го ма­те­ри­а­ла плаз­мид идут с по­мо­щью кле­точ­ных ме­ха­низ­мов, т. е. так же, как у ви­ру­сов. Плаз­ми­ды пе­ре­да­ют­ся при де­ле­нии до­чер­ним клет­кам, а также могут по­па­дать в бак­те­рии при кле­точ­ных кон­так­тах. Плаз­ми­ды несут от 2—3 до 90 генов, ко­то­рые при­да­ют клет­кам ха­рак­тер­ные свой­ства, на­при­мер: спо­соб­ность пе­ре­да­вать хро­мо­сом­ную ДНК от одной бак­те­рии к дру­гой, вы­ра­ба­ты­вать белки−яды, гу­би­тель­ные для дру­гих бак­те­рий. Уче­ные раз­ра­бо­та­ли ме­то­ды вы­де­ле­ния и вве­де­ния плаз­мид в бак­те­ри­аль­ные клет­ки. Можно, ис­поль­зуя спе­ци­аль­ные фер­мен­ты, раз­ре­зать плаз­ми­ды, встра­и­вать в них новые гены и сши­вать мо­ле­ку­лы. Такие плаз­ми­ды слу­жат для пе­ре­но­са ге­не­ти­че­ской ин­фор­ма­ции (т. е. яв­ля­ют­ся век­то­ра­ми), в ген­ной ин­же­не­рии.

Д)  По­лу­че­ние ре­ком­би­нант­ной ДНК и РНК.

Суть кон­стру­и­ро­ва­ния ре­ком­би­нант­ных ДНК за­клю­ча­ет­ся во встра­и­ва­нии фраг­мен­тов ДНК, среди ко­то­рых на­хо­дит­ся ин­те­ре­су­ю­щий нас уча­сток ДНК, в так на­зы­ва­е­мые век­тор­ные мо­ле­ку­лы ДНК (или про­сто век­то­ры) - плаз­мид­ные или ви­рус­ные ДНК, ко­то­рые могут быть пе­ре­не­се­ны в клет­ки про- или эу­ка­ри­от и там ав­то­ном­но репли-ци­ро­вать­ся. На сле­ду­ю­щем этапе про­во­дит­ся отбор тех кле­ток, ко­то­рые несут в себе ре­ком­би­нант­ные ДНК (с по­мо­щью мар­кер­ных при­зна­ков, ко­то­ры­ми об­ла­да­ет сам век­тор), и затем ин­ди­ви­ду­аль­ных кло­нов с ин­те­ре­су­ю­щим нас сег­мен­том ДНК (ис­поль­зуя при­зна­ки или пробы, спе­ци­фич­ные для дан­но­го гена или участ­ка ДНК).

По­лу­че­ние ре­ком­би­нант­ных РНК обыч­но осу­ществ­ля­ют ме­то­да­ми фер­мен­та­тив­но­го или хи­ми­че­ско­го ли­ги­ро­ва­ния РНК.

Ответ: 12112.